TÉCNICAS DE EDICIÓN GENÓMICA EN CÁNCER DE MAMA

OLAPARIB PARA CÁNCER DE MAMA METASTÁSICO EN PACIENTES CON  MUTACIÓN BRCA EN LA LÍNEA GERMINAL

Como bien sabemos, los genes BRCA son “genes supresores de tumores” que sintetizan proteínas encargadas de reparar daños en el genoma, en particular los daños en la doble cadena de ADN. El olaparib –cuyo nombre completo es poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitor – aprovecha esta debilidad para atacar a las células cancerosas deficientes en BRCA e incapaces de reparar el daño en el ADN causando lo que se denomina “letalidad sintética”. El Tratamiento con Olaparib (Lynparza) proporciona un beneficio significativo en pacientes con cáncer de mama metastásico HER2 negativo.

TERAPIA GÉNICA BASADA EN microARNs PARA CONTROLAR LA METÁSTASIS EN EL CÁNCER DE MAMA

También se destaca, un reciente estudio acerca de una Terapia génica basada en microARNs para controlar la metástasis en el cáncer de mama, el cual se plantea la combinación de quimioterapia y terapia génica basada en microARNs para controlar la metástasis en el cáncer de mama.  Para ello, en primer lugar, llevaron a cabo un rastreo de polimorfismos SNPs que estuvieran localizados en regiones de unión a microARNs en genes relacionados con el cáncer de mama. El equipo encontró que miR-96 y miR-182 regulan al gen PALLD de forma dependiente al genotipo del polimorfismo. En presencia de uno de los alelos, ambos microARNs se unen al ARN mensajero de PALLD, disminuyen su expresión y se reduce la capacidad invasiva y de migración de las células tumorales.

Referencias bibliográficas:

1. Robson M, Im S, Senkus E, Xu B, Domchek S, Masuda N et al. Olaparib for Metastatic Breast Cancer in Patients with a Germline BRCA Mutation. New England Journal of Medicine [Internet]. 2017 [cited 24 December 2017]; 377(6):523-533. Available from: http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa1706450

2. Gilam A, Conde J, Weissglas-Volkov D, Oliva N, Friedman E, Artzi N et al. Local microRNA delivery targets Palladin and prevents metastatic breast cancer. Nature Communications [Internet]. 2016 [cited 24 December 2017]; 7:1-14. Available from: https://www.nature.com/articles/ncomms12868.pdf

TERAPIA CELULAR REGENERATIVA MEDIANTE EL SECRETOMA DE LAS CELULAS MADRE MESENQUIALES (MSC)

El Secretoma de las Células Madre Mesenquiales (MSC)

Las moléculas de las MSC participan tanto en la angiogénesis, la invasión celular, y la regeneración tisular, como en el microambiente tumoral y las metástasis, con mecanismos de acción similares.  El tropismo característico de las MSC hacia el tejido enfermo puede ser utilizado para generar estrategias para la focalización tumoral. El secretoma de las MSC de la médula ósea se ha aislado en diversos tejidos, en donde las citocinas realizan diversas acciones al unirse a los receptores específicos de la superficie celular en donde ejercen su efecto. Las proteínas son secretadas por diversas vías y pueden ser identificadas por diferentes métodos; en el cáncer  desempeñan  un papel importante en los procesos de proliferación excesiva, reducción de la apoptosis, invasión inmune, angioneogénesis, alteración en el metabolismo energético y el desarrollo de resistencia a los tratamientos contra el cáncer.

MSC como terapia regenerativa celular por:

• Las MSC tienen potencial regenerativo por acciones paracrinas.
• El secretoma de las MSC puede interactuar con las células precursoras del cáncer.
• La senalización ˜ de las MSC es similar a la que está involucrada en las funciones regenerativas y en las favorecedoras para el desarrollo del cáncer

Referencias bibliográficas:

1. El secretoma de las células madre mesenquimales y la terapia celular regenerativa en cáncer [Internet]. Gaceta Mexicana de Oncología. 2016; 15(6):329---331. Disponible en: http://smeo.org.mx/images/GAMO/2016/GAMO_V15_6_2016.pdf

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA Y ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL EN CÁNCER DE MAMA

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

Algunas enzimas de la familia ribonucleasa (RNasa) han suscitado un especial interés debido a su actividad citotóxica, ya que se podrían usar como agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer.

Como ejemplo de RNasa que tienen efecto citotóxico destaca la Onconasa (ONC), una RNasa procedente de oocitos y embriones tempranos de Rana pipiens que se encuentra en estudios clínicos de fase III como agente antitumoral para el tratamiento de mesotelioma maligno presentando selectividad para células tumorales. Al unirse a la superficie de células tumorales y ser internalizada en el citosol, la ONC causa la muerte celular como resultado de la potente inhibición de la síntesis proteica mediante un mecanismo que implica la degradación del RNA celular. Es conocido que la ONC no es inhibida por el inhibidor proteico de RNasas presente en el citosol de células de mamífero (IR), lo que explica la mayor citotoxicidad de la ONC en comparación con otras RNasas de mamífero y, por consiguiente, su efecto antitumoral.

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

El anticuerpo monoclonal en cancer de mama: Trastuzumab

La terapia es un anticuerpo monoclonal que se une al receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano (HER-2), el cual es un receptor con actividad de tirosina cinasa que se expresa en altas concentraciones en algunos tipos de cáncer de seno y también en otros tipos de cáncer. El mecanismo de acción del trastuzumab no se comprende en su totalidad, pero una posibilidad probable es que impida que el HER-2 envíe señales que promuevan crecimiento. Es posible que el trastuzumab tenga también otros efectos, como inducir el sistema inmunitario para que combata a las células que expresen altas concentraciones de HER-2

Referencias bibliográficas:

1. Proteínas recombinantes con efecto antitumoral [Internet]. Vilanova.M,  Benito.A, Ribó. Marc. Universidad de Girona. 2012. Disponible en: http://www.oepm.es/pdf/ES/0000/000/02/38/80/ES-2388020_A1.pdf

2.Gil Hernández A, Sánchez de Medina Contreras F. Tratado de nutrición. 3rd ed. Madrid: Médica Panamericana; 2013. Disponible en :http://media.axon.es/pdf/79407.pdf

AMPLIFICACIÓN DEL ONCOGÉN HER2/neu EN CÁNCER DE MAMA POR HIBRIDACIÓN IN SITU FLUORESCENTE (FISH)

La hibridación in situ con fluorescencia (FISH), es una técnica de citogenética molecular en la cual se puede detectar simultáneamente cambios cromosómicos numéricos y estructurales en un locus específico de protooncogenes, localizados en un mismo o diferentes cromosoma.

Utiliza moléculas fluorescentes, llamadas fluorocromos, para poder localizar genes o fragmentos de DNA. La técnica consiste en preparar cortas secuencias de DNA de una sola hebra, estas son llamadas sondas, las que son complementarias de las secuencias de DNA a estudiar. Estas sondas son marcadas con fluorocromos y posteriormente se hibridan o unen al DNA complementario, permitiendo así localizar las secuencias en las que se encuentran. 

La amplificación o sobreexpresión de HER2 se considera el resultado de la enfermedad y el marcador predictivo de la respuesta al tratamiento. 

El análisis por FISH se realiza sobre tejido de cáncer de mama extirpado durante la biopsia con el fin de determinar si las células poseen copias adicionales del gen HER2 o no. Cuanto mayor sea la cantidad de copias del gen HER2, mayor será la cantidad de receptores HER2 que poseen las células. Estos receptores de HER2 reciben señales que estimulan la multiplicación de células del cáncer de mama.

Los resultados del análisis por FISH dirán si el cáncer es “positivo” o “negativo”  para HER2.

Las sondas de utilidad diagnóstica son:

• Sondas centroméricas: para la detección de alteraciones numéricas y como control de referencia de la hibridación de sondas de locus específicos.

• Sondas especificas del locus: para la detección de translocaciones, delecciones o amplificaciones, como sondas de fusión o sondas Split.

FISH de HER2 en cáncer de mama. El panel de la izquierda muestra células de un tumor de mama con amplificación del gen HER2 (puntos rojos ).  A la derecha podemos ver células de un tumor  sin amplificación. La paciente de la izquierda se beneficiara, en términos de supervivencia, del tratamiento trastuzumab ( anticuerpo monoclonal dirigido contra HER2).

Hibridación fluorescente in situ: Tras los pasos preparatorios y el pretratamiento, se realiza la desnaturalización y la hibridación el día 1. Se usa el kit de sonda de color dual ZytoLight® SPEC HER2 / CEN17 para la hibridación. Los portaobjetos se hibridaron durante la noche a 37 ° C. El día 2, después de los pasos de lavado, la solución DAPI / Antifade-solution (MT1) se deja caer sobre los portaobjetos. La evaluación de los portaobjetos se lleva a cabo por el microscopio de fluorescencia Olympus BX51. Con el uso de filtros apropiados, las señales del gen HER2 marcado (verde) y de las secuencias del satélite alfa del centrómero del cromosoma 17 (rojo) se cuenta en 100 células para cada muestra.

Referencias bibliográficas:

1. SAGLICAN, Y. & INCE, Ü. HER2/neu status in breast cancer specimens: Comparison of immunohistochemistry (IHC) and fluorescence in situ hybridization (FISH) methods. Int. J. Morphol., 33(2):737-742, 2015. Disponible en: http://www.scielo.cl/pdf/ijmorphol/v33n2/art51.pdf
2. BreastCancer.org. Análisis de Hibridación fluorescente in situ. 2016. Disponible: http://www.breastcancer.org/es/sintomas/analisis/tipos/fish